最新刊期
2025年第50卷第6期
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斑马鱼
p2rx2 基因敲除品系的构建与表型分析（英文） 增强出版 AI导读“In the field of genetic research, a team of experts successfully generated a p2rx2 loss-of-function zebrafish model using CRISPR/Cas9 technology, which provides a valuable tool for elucidating the molecular mechanisms of P2RX2-related hearing loss and for screening otoprotective drugs and developing gene therapies.”摘要：目的嘌呤能受体P2X2(purinergic receptor P2X2，P2RX2)基因编码对ATP敏感的离子通道，对Na⁺、K⁺和Ca²⁺等阳离子具有通透性(其中对Ca²⁺的通透性最高)。P2RX2受体功能丧失已被确定为常染色体显性遗传性耳聋41型(autosomal dominant nonsyndromic deafness 41，DFNA41)的致病原因，该疾病不仅使患者对噪声损伤更敏感，还表现为高频听力损失和老年性聋进程的加速。斑马鱼因其体型小、易饲养、发育快、繁殖力强、胚胎透明及与人类基因高度保守等优势，已成为研究人类疾病和发育机制的理想模式动物。本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑系统技术建立p2rx2基因敲除的斑马鱼模型，探究该基因缺失对听觉系统的影响，为深入解析P2RX2相关听力损失的分子机制及开发基因治疗策略提供基础。方法选用实验室自繁Tübingen (TU)品系斑马鱼，在其p2rx2基因上设计2个间隔47 bp的靶位点[小向导RNA(single-guide RNA，sgRNA)1和sgRNA2]。通过体外转录合成sgRNA，将其与Cas9蛋白按比例混合后显微注射至斑马鱼单细胞期受精卵中。培养至受精后36 h时随机抽取部分胚胎提取基因组DNA，经聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)扩增及凝胶电泳初步验证注射有效性。存活的胚胎继续培养至成鱼[初代(F0)]，剪尾取样，通过PCR及电泳进行基因型鉴定，筛选阳性嵌合体。将阳性F0与野生型斑马鱼杂交获得子一代(F1)杂合子，再通过自交获得子二代(F2)纯合突变体。利用PCR产物测序分析突变类型及遗传稳定性。针对受精后5天(5 days post-fertilization，5 dpf)的F2纯合突变体和野生型幼鱼，采用YO-PRO-1荧光染色观察侧线神经丘和耳石区毛细胞的形态与数量变化。另选取4月龄野生型和纯合突变体成鱼各9尾，检测其听觉诱发电位(auditory evoked potential，AEP)在600、800、1 000和2 000 Hz频率下的听觉阈值。结果成功构建p2rx2基因敲除的斑马鱼模型。测序证实突变体在第1个靶位点前插入了66 bp序列，并在插入序列中引入了提前终止密码子(TAA)，导致蛋白质翻译提前终止和功能丧失。突变体胚胎发育正常，未见明显形态异常。YO-PRO-1染色显示，5 dpf突变体侧线神经丘毛细胞在数量和排列上与野生型无显著差异，但耳石区毛细胞密度明显降低。AEP检测结果表明，纯合突变体在600、800、1 000和2 000 Hz频率下的听觉阈值均显著高于野生型(均P<0.001)，表明其听力敏感性全面下降。结论利用CRISPR/Cas9基因编辑系统技术成功建立了具有稳定遗传性的p2rx2基因功能丧失突变体斑马鱼模型，证实了p2rx2基因缺失会导致耳石区毛细胞发育缺陷和全频段听觉阈值升高，提示p2rx2在斑马鱼听觉毛细胞功能维持和听力感知中发挥关键作用。值得注意的是，突变仅影响耳石区而不影响侧线系统的毛细胞，表明p2rx2在不同感觉器官中的功能可能具有差异性。该模型为深入研究P2RX2相关听力损失的病理机制、筛选耳保护药物及开发基因治疗策略提供了有价值的实验工具。关键词：斑马鱼;p2rx2;嘌呤能受体P2X2;CRISPR/Cas9系统;毛细胞86|19|0更新时间：2025-09-26 - “In the field of corneal diseases, this study identifies potential pathogenetic gene mutations in patients with sporadic keratoconus in the Han Chinese population. Expert researchers verified the role of ZNF469 gene mutations in KC pathogenesis, which lays a foundation for the construction of genetic screening systems for KC patients and their families.”摘要：目的圆锥角膜(keratoconus，KC)是一种进行性角膜扩张疾病，其病因包括遗传、环境、生物力学和炎症反应等方面。本研究旨在筛查中国汉族人群中散发性KC患者的潜在致病突变基因。方法纳入25例散发性KC患者和50例无关人群匹配的健康对照，鉴定汉族人群中散发性KC患者的潜在致病突变基因。通过Sanger测序和全外显子测序(whole exome sequencing，WES)对锌指蛋白469(zinc finger protein 469，ZNF469)基因突变进行分析。同时，采用生物信息学方法分析探讨ZNF469基因对KC发病的影响。结果在KC患者中检测到5种新的错义杂合变异。新发现的2种复合杂合变异c.8986G>C(p. E2996Q)、c.11765A>C(p. D3922A)和c.4423C>G(p. L1475V)、c.10633G>A(p. G3545R)被确定为KC的潜在致病基因突变。结论ZNF469基因的突变可能参与了中国汉族KC患者的发病，突变位点可能有助于今后KC患者及其家属的遗传筛查。关键词：圆锥角膜;ZNF469基因;突变;Sanger测序;中国汉族58|18|0更新时间：2025-09-26
- “最新研究发现，膜联蛋白A2与NF-κB形成正反馈环路，加剧高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤，为糖尿病肾病防治提供新靶点。”摘要：目的细胞焦亡在糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease，DKD)肾小管间质病变中发挥重要作用。膜联蛋白A2(Annexin A2，ANXA2)参与细胞增殖、凋亡和黏附，可能与DKD密切相关，但具体机制尚不清楚。本研究探讨ANXA2在高糖诱导的肾小管上皮细胞焦亡中的作用及分子机制，为DKD的防治提供新的靶点。方法将人肾小管上皮细胞系HK-2细胞随机分为正常组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol/L葡萄糖)和高渗对照组(24.5 mmol/L甘露醇+5.5 mmol/L葡萄糖)。通过转染过表达质粒和小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)调控ANXA2表达，并分别采用5-乙炔基-2-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine，EdU)法检测细胞增殖，流式细胞术分析细胞凋亡率，以及免疫荧光观察ANXA2、p50、p65的亚细胞定位。采用蛋白质印迹法检测纤维化标志物α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin，α-SMA)、纤连蛋白(fibronectin，FN)、Ⅳ型胶原(collagen type IV，Col-IV)的表达，实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR)和蛋白质印迹法分析核转录因子(nuclear factor-κB，NF-κB)亚基p50、p65和焦亡通路因子NLR家族Pyrin域蛋白3(NLR family Pyrin domain containing 3，NLRP3)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、白细胞介素(interleukin，IL)-1β、IL-18的mRNA和蛋白质表达情况。采用免疫共沉淀实验分析ANXA2与p50、p65的蛋白质相互作用情况，染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation，ChIP)和双荧光素酶报告基因实验探讨NF-κB与ANXA2启动子结合情况。结果高糖诱导能上调HK-2细胞中ANXA2的表达并促进其核转位，差异有统计学意义(P<0.01)。高糖处理后，HK-2细胞增殖率降低，细胞凋亡率升高，α-SMA、FN和Col-IV的蛋白质表达水平均升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)；过表达ANXA2后会进一步加剧上述指标变化，差异均有统计学意义(均P<0.05)；采用siRNA干扰ANXA2表达后，可部分逆转细胞增殖率下降、凋亡率升高以及纤维化程度，差异均有统计学意义(均P<0.05)。高糖处理可激活NF-κB并上调NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA和蛋白质表达，差异均有统计学意义(均P<0.05)；过表达ANXA2会进一步增强这一效应，而干扰ANXA2表达则抑制NF-κB活化及其下游因子的表达，差异均有统计学意义(均P<0.05)。免疫共沉淀实验证实ANXA2与NF-κB亚基p65直接结合，而ChIP实验显示NF-κB亚基p65特异性结合ANXA2启动子的ChIP-2、ChIP-4、ChIP-6区域(富集倍数>1)，且以此构建对应的突变型M2、M4、M6组的荧光素酶活性较空载体对照组均升高，差异均有统计学意义(均P<0.05)，进一步证实p65正向调控ANXA2的转录。结论ANXA2与NF-κB形成正反馈环路，通过持续激活NLRP3炎症小体，促进焦亡相关通路活化，加剧高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤。靶向ANXA2或阻断其与p65的相互作用有望成为延缓DKD进展的新策略。关键词：糖尿病肾病;细胞焦亡;膜联蛋白A2;核转录因子κB;正反馈环路;NLR家族Pyrin域蛋白369|19|0更新时间：2025-09-26
- “In the field of neurotoxicity of carbon monoxide, this study introduces its research progress. Expert xx established the cytotoxic model and animal model, explored the molecular mechanisms by which retinoic acid alleviates CO-induced central nervous system damage, and verified the key role of lncRNA SNHG15 and LINGO-1 in mediating RA-induced inhibition of neuronal apoptosis. These findings provide a theoretical framework for optimizing the clinical treatment of delayed encephalopathy after acute carbon monoxide poisoning and lay an experimental foundation for elucidating its molecular mechanisms.”摘要：目的一氧化碳(carbon monoxide，CO)对中枢神经系统的毒性作用是急性一氧化碳中毒迟发性脑病(delayed encephalopathy after acute carbon monoxide poisoning，DEACMP)的关键发病机制。笔者的前期研究发现视黄酸(retinoic acid，RA)可抑制一氧化碳的神经损伤作用。本研究将进一步在体内和体外实验中探索RA缓解CO诱导的中枢神经系统损伤的分子机制。方法采用小鼠海马神经细胞系HT22及原代少突胶质细胞建立CO诱导的细胞毒性模型，并采用成年昆明小鼠建立DEACMP动物模型。使用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide，MTT]法和膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(propidium iodide，PI)双染色法检测海马神经元和少突胶质细胞的活力和凋亡水平；使用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR)实验和蛋白质印迹法检测各基因的mRNA和蛋白质表达水平；通过敲减或过表达长链非编码RNA(long noncoding RNA，lncRNA)SNHG15和LINGO-1，观察基因敲减或过表达后神经元和少突胶质细胞的改变；在DEACMP小鼠中敲减SNHG15或LINGO-1，观察中枢神经组织的改变及下游蛋白质的表达变化。结果10 和20 μmol/L RA显著逆转了CO诱导的海马神经元和少突胶质细胞凋亡、SNHG15和LINGO-1的表达下调及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)和酪氨酸激酶B受体(tyrosine kinase receptor B，TrkB)的表达上调，而过表达SNHG15或LINGO-1削弱了RA在CO诱导的细胞毒性中的保护作用(均P<0.05)；敲减SNHG15或LINGO-1可缓解CO诱导的海马神经元和少突胶质细胞凋亡，并上调BDNF和TrkB的表达水平(均P<0.05)；DEACMP模型小鼠相关实验结果表明敲减SNHG15或LINGO-1可缓解DEACMP中的中枢神经系统损伤(均P<0.05)。结论RA可缓解CO诱导的海马神经元和少突胶质细胞凋亡，从而减轻中枢神经系统损伤并提供神经保护作用。LncRNA SNHG15和LINGO-1是RA介导的神经元凋亡抑制的关键分子，并与BDNF/TrkB通路密切相关。这些发现为优化DEACMP的临床治疗提供了理论框架，并为阐明其分子机制奠定了实验基础。关键词：急性一氧化碳中毒迟发性脑病;细胞凋亡;视黄酸;神经保护作用;LINGO-1;lncRNA SNHG1545|9|0更新时间：2025-09-26
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衣康酸通过抑制神经损伤诱导蛋白1介导的质膜破裂减轻脓毒症急性肺损伤巨噬细胞泛凋亡 增强出版 AI导读
“最新研究发现，衣康酸能抑制巨噬细胞泛凋亡，为脓毒症急性肺损伤治疗提供新思路。”摘要：目的脓毒症急性肺损伤(sepsis-associated acute lung injury，S-ALI)是加强监护病房(intensive care unit，ICU)患者的重要致死原因之一，其发病机制尚未完全阐明，仍缺乏有效的治疗措施。巨噬细胞溶解性细胞死亡是S-ALI炎症级联反应的关键病理机制。其中，泛凋亡(PANoptosis)是以泛凋亡小体组装及激活为特征的新型溶解性细胞死亡方式，而神经损伤诱导蛋白1(ninjurin 1，NINJ1)作为一种新型膜成孔蛋白，在泛凋亡质膜破裂(plasma membrane rupture，PMR)中发挥关键作用。衣康酸在机体抗炎反应中发挥重要作用，但衣康酸在S-ALI巨噬细胞泛凋亡中的作用仍未阐明。本研究通过探讨衣康酸对S-ALI巨噬细胞泛凋亡的影响，旨在为治疗S-ALI提供新思路。方法采用6~8周龄、体重18~20 g雄性无特定病原体(specific pathogen free，SPF)级C57BL/6J小鼠为实验对象，经腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)建立经典S-ALI小鼠模型；采用蛋白质印迹法观察S-ALI模型小鼠肺组织泛凋亡小体相关蛋白质的表达变化，蛋白质印迹法、实时逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction，real-time RT-PCR)及糖代谢组学检测S-ALI模型小鼠肺组织内衣康酸代谢途径相关酶表达及衣康酸含量的变化。采用原代腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophages，PMs)开展细胞水平实验；采用衣康酸衍生物4-辛基衣康酸酯(4-octyl itaconate，4-OI)预处理小鼠原代PMs，加入肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha，TNF-α)和γ干扰素(interferon gamma，IFN-γ)诱导巨噬细胞泛凋亡。采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8，CCK-8)评估4-OI对巨噬细胞的毒性作用；蛋白质印迹法检测泛凋亡巨噬细胞衣康酸代谢途径相关酶的表达和4-OI对泛凋亡巨噬细胞泛凋亡小体相关蛋白质表达的影响，检测S-ALI模型小鼠肺组织内及泛凋亡巨噬细胞NINJ1蛋白的表达；活细胞染料FM4-64荧光染色检测4-OI处理对泛凋亡巨噬细胞PMR的改变，免疫荧光染色检测4-OI对泛凋亡巨噬细胞NINJ1蛋白表达及膜定位的影响；乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)试剂盒检测4-OI对培养液上清及外周血血清中LDH释放的影响；非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测S-ALI小鼠肺组织内NINJ1多聚体形成和4-OI对泛凋亡巨噬细胞NINJ1多聚体蛋白质表达的影响。结果S-ALI模型小鼠肺组织中泛凋亡小体[NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3，NLRP3)、Gasdermin D(GSDMD)、Z-DNA结合蛋白1(Z-DNA binding protein 1，ZBP1)、胱天蛋白酶(caspase)-1和caspase-3]相关蛋白质表达显著上调，混合系蛋白激酶样结构域蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein，MLKL)S345磷酸化水平升高(均P<0.05)，糖代谢组学显示衣康酸含量代偿性升高；泛凋亡巨噬细胞衣康酸合成酶顺乌头酸脱羧酶1(aconitate decarboxylase 1，ACOD1)mRNA和免疫应答基因1(immunoresponsive gene 1，IRG1)蛋白质表达均显著上调(均P<0.01)。4-OI可显著抑制泛凋亡巨噬细胞泛凋亡小体相关蛋白质的表达，逆转泛凋亡巨噬细胞培养液上清LDH的释放，恢复质膜完整性。同时，4-OI可显著抑制泛凋亡巨噬细胞成孔膜蛋白NINJ1的表达及其在细胞膜上寡聚。结论衣康酸可能通过抑制成孔蛋白NINJ1介导的PMR减轻巨噬细胞泛凋亡，本研究结果有望为S-ALI临床治疗提供新思路。关键词：脓毒症急性肺损伤;巨噬细胞;泛凋亡;衣康酸;质膜破裂;神经损伤诱导蛋白1148|14|0更新时间：2025-09-26 - “ISRIB改善老年小鼠记忆能力，通过调节氧化应激平衡，为认知损伤治疗提供新思路。”摘要：目的内质网应激抑制剂(integrated endoplasmic reticulum stress inhibitor，ISRIB)是内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)中蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase，PERK)信号通路的抑制剂，可改善老年小鼠的空间记忆及工作记忆能力。ERS与氧化应激存在多种相互作用，但是ISRIB是否通过调节ERS与氧化应激之间的平衡，进而参与认知损伤，仍有待进一步明确。本研究旨在探讨ISRIB对脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)诱导的小鼠认知损伤的改善作用及其机制。方法将8周龄雄性ICR小鼠随机分为生理盐水对照(normal saline，NS)组、LPS组和ISRIB+LPS组。NS组和LPS组连续7 d注射等体积生理盐水，LPS组小鼠于第7天腹腔注射LPS(0.83 mg/kg)建立认知损伤模型，ISRIB+LPS组小鼠连续7 d腹腔注射ISRIB(0.25 mg/kg)，第7天注射ISRIB 30 min后给予LPS(0.83 mg/kg)。采用新位置识别实验(novel place recognition test，NPRT)检测小鼠的认知能力，实时荧光定量PCR检测小鼠海马组织和前额叶皮质组织中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)及抗氧化相关基因超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase-1，SOD-1)和过氧化氢酶(catalase，CAT)mRNA表达水平的变化，检测小鼠海马组织和前额叶皮质组织中氧化应激标志物丙二醛(malondialdehyde，MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized-glutathione，GSSG)的含量。结果与NS组相比，LPS组小鼠的新位置识别比明显下降，海马组织中NOS-1、NOS-2和NOS-3的mRNA表达水平均显著上调，SOD-1和CAT的mRNA表达水平均显著下调，MDA和GSSG的含量均显著增加，而GSH的含量显著减少，GSH/GSSG的比值减小(均P<0.05)。与LPS组相比，LPS+ISRIB组小鼠的新位置识别比明显升高，海马组织中NOS-1、NOS-2和NOS-3的mRNA表达水平均显著下调，SOD-1和CAT的mRNA表达水平均显著上调，MDA和GSSG的含量均显著下降，而GSH的含量显著增加，GSH/GSSG的比值增加(均P<0.05)。但在小鼠前额叶皮质组织中无上述改变。结论ISRIB通过恢复海马组织中氧化-抗氧化的平衡改善LPS所致小鼠认知损伤。关键词：内质网应激抑制剂;内质网应激;脂多糖;认知损伤;氧化应激;海马52|13|0更新时间：2025-09-26
- “最新研究发现，脑桥前池吗啡泵治疗难治性头颈部癌痛疗效显著，安全性高，为疼痛管理提供新方案。”摘要：目的头颈部难治性癌痛患者的疼痛管理是目前临床上较为棘手的问题之一，传统鞘内给药模式镇痛作用欠佳，尚未有完善且有效的治疗手段。本研究旨在观察经腰椎入路脑桥前池吗啡泵治疗难治性头颈部癌痛的疗效及安全性。方法选取2019年9月至2023年7月中南大学湘雅二医院疼痛科收治的18例采用脑桥前池吗啡泵治疗难治性头颈部癌痛的患者为研究对象。分别于术前，术后1周、1个月、2个月收集患者疼痛数字分级评分法(Numerical Rating Scale，NRS)和抑郁自评量表(Self-rating Depression Scale，SDS)评分、日口服吗啡剂量、日暴发痛次数及术后日鞘内吗啡剂量等指标。结果术后患者各时间点的NRS、SDS评分及日口服吗啡剂量、日暴发痛次数均较术前明显降低(均P<0.05)。随着术后日鞘内吗啡剂量的缓慢增加，患者术后各时间段的日口服吗啡剂量均较术前显著减少(均P<0.05)。手术相关并发症轻微，其中恶心5例(31.3%)、头痛2例(12.5%)，低血压、尿潴留、嗜睡、便秘各1例(各6.3%)，未发生严重不良事件，患者通过对症治疗后均好转出院。结论脑桥前池吗啡泵置入术可有效控制难治性头颈部癌痛，在规范操作的前提下，具有微创、不良反应轻、用药量少的特点。关键词：脑桥前池;吗啡泵;难治性癌痛;头颈癌;鞘内靶向药物输注90|28|0更新时间：2025-09-26
- “最新研究进展显示，专家建立了超高效液相色谱-串联质谱法，高效、准确、灵敏，适用于人体生物样本中替来他明和代谢物去乙基替来他明成分的检测。”摘要：目的兽用麻醉剂替来他明为新型毒品替代物，在全球多地区出现滥用情况，对公众健康造成巨大危害，但其检测方法的灵敏度难以满足法医学实践需求。本研究旨在建立一种测定人体生物样本中替来他明及其代谢物去乙基替来他明的超高效液相色谱-串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，UPLC-MS/MS)法，并通过方法学验证其能否应用于法医学实践。方法选择SKF525A为内标，采用乙腈(含1 ng/mL SKF525A)萃取生物样本，漩涡振荡10 min，超声处理20 min，以10 000 r/min离心10 min，取500 μL上清液经0.22 μm滤膜过滤，采用高效液相色谱系统(ACQUITY UPLC H-Class PLUS)和三重四极杆质谱仪(XEVO TQ-S Micro)进行检测。色谱条件采用ACQUITY UPLC® BEH C18(1.7 µm, 2.1 mm×100 mm)色谱柱，0.3 mL/min流速，考察4种流动相体系(20 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液+甲醇、20 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液+乙腈、水+甲醇、水+乙腈)对替来他明及去乙基替来他明的分离效果。质谱条件采用电喷雾离子源正离子模式(electrospray ionization in positive mode，ESI+)、多反应监测模式(multiple reaction monitoring，MRM)，替来他明和去乙基替来他明分别选用质荷比为224.043→179.016、196.08→151.06作为定量离子对。以添加0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、20、50、100、 200 ng/mL替来他明的血样的质谱响应值为纵坐标，替来他明浓度为横坐标，通过最小二乘法进行线性回归获得校准曲线，考察替来他明在血样中的线性范围、检出限和定量限；选取替来他明低(5 ng/mL)、中(20 ng/mL)、高(100 ng/mL)3种浓度制备多份血液、肝脏及肾脏的阳性添加样本和空白样本，经前处理后上机进行检测分析并记录其响应值，考察替来他明在不同生物样本中的精密度、准确度、基质效应、提取回收率和稳定性。最后，采用UPLC-MS/MS定量检测实际案例获取的替来他明样本，以验证其适用性。结果建立的UPLC-MS/MS法可同时检测人体生物样本中的替来他明及代谢物去乙基替来他明，保留时间分别为3.42 min和2.82 min。以流动相A(20 mmol/L乙酸铵和0.1%甲酸水溶液)和流动相B(乙腈)梯度洗脱替来他明和去乙基替来他明的效果最佳。血液样品中替来他明在0.1~200 ng/mL范围内线性关系良好，相关系数r=0.992，决定系数R2=0.983，检出限为0.03 ng/mL，定量限为0.1 ng/mL，提取回收率为92%~107%，基质效应为71%~99%；肝脏样本中的提取回收率为91%~98%，基质效应为69%~96%；肾脏样本中的提取回收率为93%~104%，基质效应为72%~100%。本方法在不同样本中的日内、日间精密度[以相对标准偏差(relative standard deviation，RSD)表示]和准确度[以相对误差(relative error，RE)表示]均控制在15%以内，且样本在-20 ℃冻存条件下表现出良好的稳定性。从实际案件获取的生物样本中检测到替来他明成分：案例1血液、肝脏、肾脏样本含量分别为0.37 μg/mL、0.15 μg/g、0.11 μg/g，案例2血液样本含量为8.75 ng/mL；在血样中检测到代谢物去乙基替来他明成分。结论UPLC-MS/MS法高效、准确、灵敏，适用于人体生物样本中替来他明和代谢物去乙基替来他明成分的检测。关键词：法医毒理学;新精神活性物质;替来他明;去乙基替来他明;生物样本176|72|0更新时间：2025-09-26
- “最新研究构建列线图和机器学习模型，有效预测脓毒症合并DVT患者院内死亡风险，为临床决策提供量化工具。”摘要：目的全球流行病学数据显示加强监护病房(intensive care unit，ICU)中20%~30%的脓毒症患者因合并凝血病而进展为深静脉血栓(deep vein thrombosis，DVT)，相关病死率达25%~40%。然而，现有预后评估工具存在局限，本研究旨在构建列线图和机器学习模型预测脓毒症合并DVT患者发生院内死亡的风险，并分析其临床适用性。方法基于重症监护医学信息数据库第4版(Medical Information Mart for Intensive Care IV，MIMIC-IV)(n=2 235)、电子重症监护协作研究数据库(eICU Collaborative Research Database，eICU-CRD)(n=1 274)和中南大学湘雅三医院加强监护病房入院数据集(定义为CSU-XYS-ICU数据集)(n=107)的多中心回顾性数据。将MIMIC-IV按7:3分为模型训练集(n=1 584)和内部验证集(n=651)，其余作为外部验证集。通过最小绝对收缩和选择算子(least absolute shrinkage and selection operator，LASSO)回归和贝叶斯信息准则(Bayesian information criterion，BIC)筛选变量，并构建列线图模型；采用极限梯度提升算法(extreme gradient boosting，XGBoost)构建机器学习模型。评估指标包括C指数、校准曲线、Brier评分、决策曲线分析(decision curve analysis，DCA)和净重分类改善指数(net reclassification improvement index，NRI)。结果通过LASSO回归和BIC筛选出年龄[比值比(odds ratio，OR)=1.02，95% CI 1.01~1.03，P<0.001]、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin，APTT)最小值(OR=1.09，95% CI 1.08~1.11，P<0.001)、APTT最大值(OR=1.01，95% CI 1.00~1.01，P<0.001)、乳酸最大值(OR=1.56，95% CI 1.39~1.75，P<0.001)及血肌酐最大值(OR=2.03，95% CI 1.79~2.30，P<0.001)5个关键预测因子构建列线图模型。模型在内部验证(C指数=0.845，95% CI 0.811~0.879)和外部验证(eICU-CRD，C指数=0.827，95% CI 0.800~0.854；CSU-XYS-ICU，C指数=0.779，95% CI 0.687~0.871)中表现稳健，校准曲线显示预测与实际一致性高(Brier评分<0.25)，DCA证实了临床获益。XGBoost模型训练集受试者操作特征(receiver operating characteristic，ROC)的曲线下面积(area under the curve，AUC)为0.982(95% CI 0.969~0.985)，但外部验证效能下降(eICU-CRD，AUC=0.825，95% CI 0.817~0.861；CSU-XYS-ICU，AUC=0.766，95% CI 0.700~0.873)，但仍高于临床阈值。XGBoost模型较列线图模型净获益略低(NRI=0.58)。结论列线图与XGBoost均可有效预测脓毒症合并DVT患者发生院内死亡的风险，但列线图在泛化能力及临床适用性上更具优势，其可视化评分系统为识别高危患者和实施个体化干预提供了量化工具。关键词：脓毒症;深静脉血栓;机器学习模型;列线图模型;极限梯度提升算法;危险因素;院内死亡104|37|0更新时间：2025-09-26
- “Reporting on the latest research in the field of near vision loss (NVL), this study analyzes the burden of NVL in China by sex and age groups from 1990 to 2021 and projects trends over the next 15 years. Using data from the Global Burden of Disease (GBD) 2021 database, researchers conducted descriptive analyses of NVL prevalence in China, calculated age-standardized prevalence rates (ASPR) and age-standardized disability-adjusted life years rates (ASDR) to compare burden differences between sexes and age groups, and applied an autoregressive integrated moving average (ARIMA) model to predict NVL trends for the next 15 years. The study reveals a marked increase in the NVL burden in China and predicts continued growth in the coming years. Public health policies should prioritize NVL prevention and control, with special attention to women and middle-aged populations to mitigate long-term societal and health impacts.”摘要：目的近视力损失(near vision loss，NVL)是全球视力损伤的主要原因之一，对个人生活质量和社会经济发展有深远影响。本研究旨在分析1990至2021年中国不同性别和年龄组的NVL负担，并预测未来15年的趋势。方法利用全球疾病负担(Global Burden of Disease，GBD)2021数据集，采用描述性统计分析评估中国NVL的流行趋势，计算年龄标准化患病率(age-standardized prevalence rates，ASPR)和年龄标准化伤残调整生命年率(age-standardized disability-adjusted life years rates，ASDR)，以比较不同性别和年龄组的负担差异。此外，使用自回归积分滑动平均(autoregressive integrated moving average，ARIMA)模型进行时间序列分析，以预测未来15年的NVL趋势。该模型的选择基于最佳拟合标准，以确保预测的可靠性。结果从1990至2021年，中国NVL的ASPR从10 096.24/10万上升至15 624.54/10万，ASDR从101.75/10万上升至158.75/10万。性别分析显示：2021年女性的ASPR(16 551.70/10万)高于男性(14 686.21/10万)，且女性的ASDR(167.69/10万)也高于男性(149.76/10万)。2021年，中国在全球范围内NVL的患病例数和伤残调整生命年(disability-adjusted life years，DALYs)最高，女性负担明显超过男性(ASPR：16 551.70/10万 vs 14 686.21/10万)。此外，预测趋势显示这一性别差距将持续到2036年。与1990年相比，2021年的患病人数和DALYs分别增加了239.20%和238.82%，女性和中年组(55~59岁)的负担尤为严重。ARIMA模型预测，到2036年，NVL的患病率和DALYs率将继续上升，女性仍将面临比男性更高的负担。结论本研究揭示了中国NVL负担显著增加的趋势，并预测其未来将继续上升，建议在公共卫生政策中优先预防和控制NVL，特别需要关注女性和中年组，以减轻其对社会和个人健康的长期影响。关键词：中国;近视力损伤;全球疾病负担数据库;自回归积分滑动平均模型;性别差异58|14|0更新时间：2025-09-26
- “在精神健康领域，成都社区精神分裂症患者病耻感与生活质量关联研究显示，病耻感直接影响患者生活质量，并通过焦虑抑郁间接影响，减轻病耻感和预防焦虑抑郁可提升患者生活质量。”摘要：目的社区精神分裂症患者常存在病耻感，病耻感严重影响患者的精神症状及生活质量。本研究旨在探索社区精神分裂症患者病耻感与生活质量之间的关联，以及焦虑和抑郁症状在两者间的中介作用。方法采用多阶段分层整群随机抽样方法选取四川省成都市社区精神分裂症患者进行问卷调查。问卷调查内容包括一般人口学特征、病耻感问题、广泛性焦虑自评量表(Generalized Anxiety Disorder-7，GAD-7)、抑郁症筛查量表(Patient Health Questionnaire-9，PHQ-9)以及简明健康调查量表(the 12-item Short Form Health Survey，SF-12)等。SF-12用于评估生活质量，包括躯体健康和心理健康层面。采用多重中介模型分析焦虑和抑郁症状共同在患者病耻感与生活质量之间的中介效应。结果最终纳入1 087例社区精神分裂症患者，年龄为(50.68±12.73)岁，男性525例(48.30%)。存在病耻感的患者543例(49.95%)。有292例(26.86%)有焦虑症状，407例(37.44%)有抑郁症状。躯体健康生活质量评分为72.01±20.99，心理健康生活质量评分为71.68±19.38。多重中介分析结果显示：社区精神分裂症患者病耻感不仅可以直接影响生活质量，也可以通过焦虑和抑郁症状间接影响生活质量。焦虑和抑郁症状共同在病耻感对躯体健康生活质量中的总中介比例为42.26%，在对心理健康生活质量影响中的总中介比例为47.51%。结论减轻社区精神分裂症患者的病耻感并预防焦虑和抑郁症状能够有效提升患者的生活质量，有助于患者重新融入社会。关键词：精神分裂症;病耻感;生活质量;焦虑;抑郁;中介分析101|41|0更新时间：2025-09-26
论著
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STMN1在肿瘤中作用的研究进展 AI导读
“在肿瘤学领域，STMN1作为微管结合蛋白，通过调控细胞骨架形成和细胞周期进程，促进肿瘤细胞增殖、侵袭、转移和血管生成，影响抗肿瘤免疫，与肿瘤耐药和预后不良正相关，具有作为肿瘤生物标志物和治疗分子靶点的潜力。”摘要：胞浆磷蛋白1(stathmin 1，STMN1)是一种微管结合蛋白，可促进微管解聚或抑制微管组装，调控细胞骨架形成、细胞周期进程等过程。STMN1在多种肿瘤中表达上调，主要通过核因子κB(nuclear factor-κB，NF-κB)、促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)、铁死亡等经典途径促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移，以及血管生成等恶性行为。STMN1还可通过影响机体免疫细胞功能，干预抗肿瘤免疫。临床数据显示STMN1高表达与肿瘤耐药和预后不良呈正相关，提示STMN1有作为肿瘤生物标志物和治疗分子靶点的潜能，具有重要的临床意义。关键词：胞浆磷蛋白1;微管;肿瘤;铁死亡;肿瘤免疫;肿瘤耐药125|29|0更新时间：2025-09-26 - “最新研究发现，胱天蛋白酶-3是调控非酒精性脂肪性肝病中细胞焦亡和凋亡的关键枢纽，有望成为防治新靶点。”摘要：非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是全球肝病的主要原因，包括非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver，NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis，NASH)和晚期纤维化，可导致肝硬化，最终发展为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)。肝脏中脂肪酸过度累积会引发一系列肝细胞死亡并加剧NAFLD的进展，其中细胞焦亡和凋亡被视为NAFLD进展的关键事件。新近研究发现：胱天蛋白酶-3(cysteine aspartic acid specific protease-3，caspase-3)是调控NAFLD中细胞焦亡和凋亡的关键枢纽，活化的caspase-3不仅直接导致细胞凋亡，还可切割焦孔素E(gasdermin E，GSDME)的N端结构域，破坏细胞膜，释放炎症因子，介导细胞焦亡。抑制NAFLD中caspase-3的表达可减缓肝细胞中细胞损伤(如肝细胞气球样变)、促炎信号转导以及细胞凋亡，caspase-3可能是调控肝细胞焦亡和凋亡的关键，有望成为防治NAFLD的新靶点。关键词：非酒精性脂肪性肝病;细胞焦亡;细胞凋亡;胱天蛋白酶-3;串扰140|69|0更新时间：2025-09-26
- “最新研究发现，天然产物中的黄酮类、萜类和酚类等有效成分，可通过调节关键信号通路，对不同诱因诱导的COPD动物模型发挥治疗作用，为COPD研究开辟新方向。”摘要：慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)目前尚无有效治疗手段遏制其病变进展。因此寻找防治COPD的药物是当今人们所关注的热点课题。天然产物具有易得性、经济性和毒性小等特点，研究其有效组分对不同诱因诱导的CODP动物模型的药理作用及相关信号通路分子机制是COPD研究的重要方向之一。针对香烟烟熏、香烟烟熏联合脂多糖、空气污染、弹性蛋白酶、细菌或病毒感染等不同诱因诱导的COPD动物模型，天然产物中含有的黄酮类、萜类和酚类等有效成分可通过调节核转录因子红系2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase-1，HO-1)、核因子κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)等关键信号通路发挥抗炎、抗氧化、改善气道黏液异常分泌及抑制气道重塑等治疗作用。这些研究成果不仅为COPD的临床诊疗提供了理论依据，也为后续科研探索指明了方向。关键词：天然产物;慢性阻塞性肺疾病;造模方法;动物模型;治疗作用112|309|0更新时间：2025-09-26
- “单细胞RNA测序技术在乳腺细胞异质性研究中取得进展，为揭示乳腺发育及相关疾病分子机制提供新思路。”摘要：乳腺细胞亚群的时空异质性作为乳腺细胞生理发育、病理演变及乳腺肿瘤发生和发展的核心生物学基础，但其复杂的调控机制尚未完全阐明。单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing，scRNA-seq)技术凭借其高分辨率的优势，为解析乳腺细胞异质性提供了强大的工具。该技术能够构建高精度乳腺细胞图谱，准确鉴定不同细胞亚群，并重构从干/祖细胞向功能性上皮细胞分化的轨迹。通过揭示细胞命运决定的转录调控网络、细胞间的通讯模式以及微环境的动态互作，scRNA-seq不仅深化了人们对乳腺发育分子机制的理解，也为阐明乳腺癌、巨乳症等相关疾病的发病机制提供了新视角。scRNA-seq在发现疾病早期分子标志物、解析肿瘤异质性与治疗抵抗机制方面展现出巨大潜力。总结scRNA-seq技术在乳腺细胞异质性研究中的应用进展，并整合空间组学等多模态数据，可为揭示乳腺发育及相关疾病的分子机制和制订精准治疗策略提供关键证据和新思路。关键词：单细胞RNA测序;乳腺发育;乳腺癌;巨乳症;转录组学;胚胎多能祖细胞82|42|0更新时间：2025-09-26
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胶原膜在口腔医学领域的应用进展 AI导读
“在口腔医学领域，研究人员通过多种方法优化胶原膜性能，以满足临床需求，为提升治疗效果提供新思路。”摘要：胶原膜因具有来源广、可降解吸收、免疫原性低等优良特性而备受研究者关注，但存在机械稳定性差、降解速度过快等缺点。为提升其理化性质与生物学功能，研究人员开发了交联、搭载生长因子或药物、与其他优良材料复合、优化其成分与结构、用海洋胶原蛋白替代等方法，以拓宽其在口腔医学方面的应用。口腔医学领域对高性能生物材料的需求迫切，通过总结胶原膜在口腔医学领域的应用进展，深入剖析其作用机制、临床疗效及局限性，可为优化胶原膜设计和拓展其临床应用提供参考。同时，进一步探讨结合先进制造技术、开发个性化胶原膜的未来研究趋势，可为提升口腔疾病治疗效果贡献力量。关键词：胶原膜;牙周炎;骨再生;角化黏膜;上颌窦穿孔;骨缺损;味觉出汗综合征;牙髓再生41|5|0更新时间：2025-09-26
综述
- “在子宫弥漫性平滑肌瘤病治疗领域，中南大学湘雅三医院妇产科专家总结了5例个性化治疗方案，成功帮助患者保留生育功能并实现妊娠。”摘要：目的目前，子宫切除术是子宫弥漫性平滑肌瘤病(diffuse uterine leiomyomatosis，DUL)唯一确切有效的治疗方法，但对希望保持生育能力的DUL患者来讲，尚无统一的治疗方案。本研究总结与分析了5例希望保留生育功能DUL患者的个性化治疗过程和治疗效果，旨在为同类患者实施个体化临床治疗提供参考依据。方法回顾性分析中南大学湘雅三医院妇产科收治的5例有生育愿望DUL患者的临床资料。为保留患者生育能力，根据其临床表现及肌瘤分布特点，采用个体化的治疗方案。1例采用高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound，HIFU)治疗，1例行宫腔镜子宫肌瘤切除术(hysteroscopic myomectomy，HM)联合腹腔镜子宫肌瘤切除术(laparoscopic myomectomy，LRM)，1例行HIFU治疗联合HM及LRM，1例行药物治疗联合分期HM，1例行HIFU治疗联合分期HM和药物治疗。分析5例患者的治疗效果和妊娠结局。结果治疗后，5例患者月经量或痛经症状均有明显改善，子宫体积均明显缩小；3例患者发生轻度宫腔粘连。5例患者均成功妊娠，其中1例因慢性高血压合并重度子痫前期于孕34周行剖宫产，其余4例均足月剖宫产分娩。发生胎盘植入3例，产后出血2例。在远期随访过程中，1例患者因月经量增多于产后2年行子宫全切术，其余4例病情稳定。结论根据DUL患者病情选择个体化的治疗方案，能够保留其生育功能，辅助其成功妊娠并获得良好的妊娠结局。关键词：子宫弥漫性平滑肌瘤病;高强度聚焦超声;宫腔镜子宫肌瘤切除术;腹腔镜子宫肌瘤切除术;生育力保留;个体化治疗27|6|0更新时间：2025-09-26
短篇论著
- “在儿童白血病治疗领域，研究者发现耶氏肺孢子菌肺炎常在化疗早期发生，气促和低氧血症为主要症状，tNGS检测有助于早期诊断，复方磺胺甲噁唑治疗有效。”摘要：耶氏肺孢子菌肺炎(Pneumocystis jirovecii pneumonia，PJP)是一种机会感染性肺部疾病，常发生于免疫功能低下的患儿。本文报告1例婴儿白血病合并PJP的病例，并进行相关文献复习。总结分析10例婴儿白血病合并PJP感染患儿(文献报道9例，本中心1例)发现：PJP多发生在化疗早期(80%，8/10)，临床表现主要为气促(100%，10/10)和低氧血症(50%，5/10)，而肺部影像学表现无明显特异性。50%(5/10)的患儿通过肺泡灌洗液显微镜检查找出病原体进行诊断，本例患者通过肺泡灌洗液病原靶向二代测序(targeted next-generation sequencing，tNGS)诊断。治疗上，使用静脉复方磺胺甲噁唑治疗8例，最终8例患儿治愈。婴儿白血病的化疗早期可能出现PJP，应提早预防，tNGS检测有助于PJP的早期诊断，治疗上可应用复方磺胺甲噁唑。关键词：婴儿白血病;耶氏肺孢子菌肺炎;肺泡灌洗液;靶向二代测序;复方磺胺甲噁唑78|36|0更新时间：2025-09-26
临床病例讨论
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